Analiza PCR: co to jest? Jak poprawnie wykonać test PCR

Nie tak dawno temu, niezawodne,bardzo czuła i szybka metoda diagnozowania różnych chorób zakaźnych człowieka. Ta metoda nazywana jest "analizą PCR". Co to jest, jaka będzie jego istota, jakie drobnoustroje może ujawnić i jak właściwie przekazać, powiemy w naszym artykule.

Historia odkrycia

Wynalazł metodę reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR)Amerykański naukowiec Cary Myullis w 1983 roku. Początkowo opatentował metodę diagnozy przez firmę "Cetus Corporation", w której pracował jego twórca. Jednak w 1992 roku wszystkie prawa i patenty zostały sprzedane firmie "Hoffman-La Roche". Następnie okazało się, że podobne podobne badania zostały przeprowadzone i zostały zarejestrowane przez innych biologów amerykańskich, takich jak Alice Chen, David Edgar, John Treel. W 1980 r. Problem ten rozwiązali sowieccy naukowcy A. Slyusarenko, A. Kaledin i S. Gorodetsky. W związku z tym niemożliwe było ustalenie jedynego podmiotu praw autorskich. Wielu wybitnych biochemików przyczyniło się do rozwoju metody reakcji łańcuchowej polimerazy i opatentowało swoje innowacje. W tej chwili analiza PCR jest przeprowadzana wszędzie w specjalnie wyposażonych laboratoriach.

PODSUMOWANIE PCR diagnostyczny

Analiza PCR: co to jest i jak działa? Istotą metody jest zwiększenie określonej pożywki mikrobiologicznej za pomocą specjalnego enzymu polimerazy DNA w sztucznych warunkach. Aby to zrobić, pomnóż istniejący materiał DNA. Tak więc, w obecności patogennego drobnoustroju w próbce, jego ilość zostanie zwiększona poprzez biochemiczne manipulacje laboratoryjne, a bakterię można łatwo wykryć w mikroskopie.

Analiza PCR - co to jest?

W jaki sposób prowadzone są badania materiałowe?

Analiza wymaga:

  • Matryca DNA;
  • primery łączące końce fragmentu materiału;
  • termostabilny enzym polimerazy DNA;
  • substancje chemiczne, które zapewniają prawidłowe funkcjonowanie enzymów;
  • roztwór buforowy niezbędny do stworzenia odpowiednich warunków dla wzrostu i rozwoju materiału DNA.

    Analiza PCR 12

W celu przeprowadzenia PCR wykonuje się 25-30 powtórzeń, składających się z trzech etapów: denaturacji, przyłączania i wydłużania.

Do analizy reakcji łańcuchowej polimerazyużyj specjalnego urządzenia - wzmacniacza. Nowoczesny sprzęt pozwala ustawić program niezbędny do ogrzewania i chłodzenia lamp, aby wyeliminować błędy podczas diagnozy.

Gdzie jest diagnoza?

Metoda łańcuchowej reakcji polimerazy stosowana jest w różnych dziedzinach medycyny:

  • Naukowcy kryminalisty używają go do identyfikacji materiału genetycznego, takiego jak włosy, ślina lub krew;
  • Analiza krwi PCR pomaga w genotypowaniu, na przykład, w celu wykrycia indywidualnej genetycznie zmodyfikowanej reakcji na konkretny lek;
  • za pomocą takiej metody ustalić istnienie więzi rodzinnych między ludźmi;
  • najbardziej popularna metoda PCR stała się w diagnostyce medycznej dla określenia różnych chorób zakaźnych.

Jakie infekcje ujawniają PCR?

Tak więc medycyna długo i skutecznie wykorzystała analizę PCR. Co to jest, już się nauczyliśmy. A jakie patogeny można z nim wykryć? Następujące choroby zakaźne są diagnozowane przez PCR:

  • zapalenie wątroby typu A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • Kandydoza;
  • chlamydia;
  • mikoplazmoza;
  • gardnerellez;
  • mononukleoza zakaźna;
  • rzęsistkowica;
  • infekcja wirusem brodawczaka;
  • gruźlica;
  • infekcja opryszczką typów pierwszego i drugiego;
  • Helicobacteriosis;
  • wirus cytomegalii;
  • błonica;
  • salmonelloza;
  • Zakażenie HIV.

    Analiza PCR dla wirusa HIV

Również metody PCR są stosowane w diagnostyce raka.

Zalety

Diagnoza PCR ma kilka zalet:

  1. Wysoka czułość. Nawet przy tylko kilku cząsteczkach DNA mikroorganizmu, analiza PCR determinuje obecność infekcji. Metoda pomoże w chronicznych i utajonych chorobach. Często w takich przypadkach mikroorganizm jest nieuprawiany w inny sposób.
  2. Do badań odpowiedni jest dowolny materiał, taki jak ślina, krew, seks, włosy, komórki nabłonkowe. Najczęstszym jest badanie krwi i rozmaz moczowo-płciowy w PCR.

    PCR: podejmij test

  3. Nie wymaga długotrwałej uprawy. Zautomatyzowany proces diagnostyczny pozwala uzyskać wyniki badania po 4-5 godzinach.
  4. Metoda jest prawie w 100% niezawodna. Zarejestrowano tylko pojedyncze przypadki fałszywie ujemnego wyniku.
  5. Zdolność do identyfikowania kilku typówpatogeny z pojedynczej próbki materiału. To nie tylko przyspiesza proces diagnozowania choroby, ale także znacznie zmniejsza koszty materiałowe. Często lekarz przepisuje kompleksową analizę PCR. Cena egzaminu, składająca się z definicji sześciu patogenów, wynosi około 1500 rubli.

Zalecenia dotyczące przygotowania do analizy

Aby wyniki były wiarygodne w badaniu PCR, należy przeprowadzić analizę zgodnie z zaleceniami dotyczącymi wstępnego przygotowania do diagnozy:

  1. Przed podaniem śliny należy powstrzymać się od przyjmowania pokarmów i przyjmowania leków 4 godziny przed przyjęciem leku. Bezpośrednio przed zabiegiem przepłukać usta gotowaną wodą.
  2. Powyższe zasady powinny być przestrzegane podczas pobierania próbki z wewnętrznej powierzchni policzka. Po płukaniu zaleca się wykonanie masażu skóry w celu wyizolowania wydzieliny gruczołu.
  3. Mocz jest zwykle zbierany w domu. Aby to zrobić, musisz przeprowadzić dokładną toaletę genitaliów. Konieczne jest zbieranie 50-60 ml moczu w sterylnym plastikowym pojemniku. Aby zapewnić czystość materiału, kobiety powinny wkładać tampon do pochwy, a mężczyźni maksymalnie pociągnąć fałd skóry. Nie możesz wziąć materiału podczas menstruacji.
  4. Do dostarczenia nasienia trzeba powstrzymać się od seksudziałać w ciągu 3 dni przed pobraniem materiału. Lekarze radzą nie chodzić do sauny, brać gorącej kąpieli, pić alkoholu i pikantnych potraw. 3 godziny przed analizą należy powstrzymać się od oddawania moczu.
  5. W przypadku dostarczania rozmazu moczowo-płciowego, na przykład, jeśliPrzeprowadzono analizę chlamydii, zalecana jest reakcja PCR dla kobiet i mężczyzn przez 3 dni. 2 tygodnie przed analizą nie można przyjmować leków przeciwbakteryjnych. Przez tydzień należy przestać stosować żele intymne, maści, czopki dopochwowe, douching. 3 godziny przed badaniem powinieneś powstrzymać się od oddawania moczu. Podczas menstruacji materiał nie jest zbierany, tylko 3 dni po ustaniu krwawienia można wykonać rozmaz moczowo-płciowy.

PCR podczas ciąży

Istnieje wiele zakaźnychchoroby przenoszone drogą płciową są niezwykle niebezpieczne dla prawidłowego rozwoju płodu. Choroby przenoszone drogą płciową mogą powodować opóźnienie wzrostu wewnątrzmacicznego, poronienie lub przedwczesne porody oraz wrodzone wady rozwojowe dziecka. Dlatego niezwykle ważne jest poddanie się badaniu PCR we wczesnej ciąży. Przekazanie analizy jest niezbędne do rejestracji - do 12 tygodni.

Analiza PCR Chlamydii

Materiał pobierany jest z kanału szyjki macicy.za pomocą specjalnego pędzla. Zabieg jest bezbolesny i nie stanowi zagrożenia dla dziecka. Zwykle podczas ciąży analizuje się chlamydię za pomocą metody PCR, a także ureaplasmosis, mykoplazmozę, wirus cytomegalii, opryszczkę, wirusa brodawczaka. Tak złożona ankieta nazywa się PCR-6.

PCR do diagnozy HIV

Ze względu na fakt, że metoda łańcucha polimerazyreakcje są bardzo wrażliwe na zmiany w ciele i stanach diagnozy, wiele czynników może wpływać na wynik. Dlatego analiza PCR pod kątem zakażenia HIV nie jest niezawodną metodą, jej skuteczność wynosi 96-98%. W pozostałych 2-4% przypadków test daje wyniki fałszywie dodatnie.

Ale w niektórych sytuacjach bez diagnostyki wirusa HIVnie wystarczy. Zwykle przeprowadza się go u osób z fałszywie ujemnym wynikiem testu ELISA. Takie wskaźniki sugerują, że dana osoba nie rozwinęła jeszcze przeciwciał przeciwko wirusowi i nie może być wykryta bez wielokrotnego zwiększenia jej ilości. Można to osiągnąć, wykonując badanie krwi metodą PCR.

Taka diagnoza jest również konieczna dla dzieci w pierwszym roku życia urodzonych przez matkę zakażoną wirusem HIV. Metoda ta jest jedynym sposobem wiarygodnego określenia statusu dziecka.

PCR do diagnozy zapalenia wątroby

Pozwala na to metoda reakcji łańcuchowej polimerazywykryć DNA wirusowego zapalenia wątroby typu A, B, C na długo przed powstaniem przeciwciał przeciwko infekcji lub początku objawów choroby. Analiza PCR w przypadku zapalenia wątroby typu C jest szczególnie skuteczna, ponieważ w 85% przypadków choroba ta przebiega bezobjawowo i bez szybkiego leczenia przechodzi w fazę przewlekłą.

Test krwi PCR

Wczesne wykrycie patogenu pomoże uniknąć powikłań i długotrwałego leczenia.

Kompleksowe badanie PCR

Kompleksowa analiza PCR: co to jest? Test ten sposób polimezarnoy Reakcja łańcuchowa, która obejmuje określenie jednocześnie kilka gatunków zakażenia Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, wirus cytomegalii, Ureaplasma urealitikum, opryszczki typu 1 i 2, rzeżączkę brodawczaka. Cena takiej diagnostyki waha się od 2000 do 3500 rubli. w zależności od kliniki, używanych materiałów i wyposażenia, a także rodzaju analizy: jakościowej lub ilościowej. Co jest potrzebne w twoim przypadku - lekarz zadecyduje. W niektórych przypadkach wystarczy tylko określić obecność patogenu, w innych, na przykład w przypadku zakażenia HIV, miano ilościowe odgrywa ważną rolę. W diagnozie wszystkich powyższych patogenów badanie jest nazywane "analizą PCR-12".

Odszyfrowanie wyników analizy

Dekodowanie analizy PCR jest łatwe. Są tylko 2 skale wskaźnika - "wynik dodatni" i "wynik negatywny". Po wykryciu patogenu lekarze mogą potwierdzić obecność choroby z 99% pewnością i przejść do leczenia pacjenta. W ilościowej metodzie określania infekcji w odpowiedniej kolumnie zostanie wskazany numeryczny wskaźnik wykrytych bakterii. Tylko lekarz może określić zakres choroby i przepisać niezbędne leczenie.

Gdzie przesłać analizę PCR?

W niektórych przypadkach, na przykład przy ustalaniuZakażenie HIV przez PCR, z wynikiem ujemnym, konieczne jest przeprowadzenie dodatkowych badań w celu potwierdzenia uzyskanych wskaźników.

Gdzie należy wziąć analizę?

Gdzie przesłać analizę PCR: w publicznej klinice lub w prywatnym laboratorium? Niestety w miejskich placówkach medycznych sprzęt i metody są często nieaktualne. Dlatego lepiej jest preferować prywatne laboratoria z nowoczesnym sprzętem i wysoko wykwalifikowanym personelem. Ponadto w prywatnej klinice otrzymasz wyniki znacznie szybciej.

W Moskwie oferuje wiele prywatnych laboratoriówAnaliza PCR dla różnych infekcji. Na przykład w klinikach takich jak Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro wykonywana jest analiza PCR. Cena ankiety wynosi 200 rubli. do oznaczania jednego patogenu.

Można stwierdzić, że diagnoza zakaźnachoroby za pomocą PCR w większości przypadków to szybki i niezawodny sposób wykrywania patogenu w organizmie we wczesnych stadiach zakażenia. Niemniej jednak w niektórych przypadkach warto wybrać inne metody diagnostyki. Tylko specjalista może określić potrzebę takiego badania. Dekodowanie analizy PCR wymaga również profesjonalnego podejścia. Postępuj zgodnie z zaleceniami lekarza i nie podejmuj własnych testów, które nie są konieczne.

Podobało mi się:
0
Analiza moczu przez Nechiporenko. Jak go złożyć
Ogólna analiza moczu. Jak wziąć i jaka jest norma?
Jak testowana jest krew utajona w kale?
Gdzie można wziąć kleszcz do analizy? Co robić, kiedy
Jak prawidłowo przekazać analizę kału i czy jest to konieczne
Jak poprawnie oddawać krew hormonom?
Można wykonać badanie krwi na obecność wirusa HIV
Jak prawidłowo przesłać test moczu?
Co powie analiza moczu (dekodowanie)
Najlepsze posty
w górę